Yazdır

Kısa Bildiri/Short Communication
Mikrobiyol Bul 2016; 50(2): 293-299

Kan K�lt�rlerinden İzole Edilen Candida T�rlerinin Tanımlanmasında
Peptid N�kleik Asit Floresan İn Situ Hibridizasyon (PNA FISH) Y�nteminin Değerlendirilmesi*

Evaluation of Peptide Nucleic Acid Fluorescent In Situ Hybridization (PNA FISH) Method in the
Identification of Candida Species Isolated From Blood Cultures

Gonca AYDEMİR, Ayşe Nedret KO�, Mustafa Altay ATALAY

Erciyes �niversitesi Tıp Fak�ltesi, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Kayseri.

Erciyes University Faculty of Medicine, Department of Medical Microbiology, Kayseri, Turkey.

* Bu �alışma, Erciyes �niversitesi Bilimsel Araştırma Projesi (Proje No: TSY-11- 3704) tarafından desteklenmiştir.

�Z

Son yıllarda yoğun bakım �nitelerinde yatan, imm�n s�presif tedavi alan ve geniş spektrumlu antibiyotik kullanan hastaların sayısının artması, sistemik kandidoz insidansını artırmıştır. Bu t�r hastalarda en sık g�r�len klinik g�sterge, kandidemidir. Kan k�lt�rlerinden Candida t�rlerinin geleneksel morfolojik ve biyokimyasal y�ntemler ile tanımlanması uzun s�rmektedir. Bu nedenle hızlı, g�venilir ve doğru sonu� veren y�ntemlere ihtiya� vardır. Bu ama�la, direkt tanımlama yapabilen yeni sistemler geliştirilmiştir. Bu �alışmada; kan k�lt�rlerinde �reyen Candida t�rlerinin tanımlanmasında, peptid n�kleik asit floresan in situ hibridizasyon (PNA FISH) y�nteminin performansının, konvansiyonel y�ntemlerle karşılaştırılarak değerlendirilmesi ama�lanmıştır. �alışmaya, Temmuz 2011-Temmuz 2012 tarihleri arasında, Erciyes �niversitesi Tıp Fak�ltesi Hastaneleri kliniklerinde sistemik mantar enfeksiyonu �n tanısıyla takip edilen ve kan k�lt�r�nde maya �reyen 50 hasta alınmıştır. İzole edilen Candida suşlarının tanımlanması; makroskobik ve mikroskobik morfoloji, �imlenme borusu testi, siklohekzimid hassasiyeti, �reaz aktivitesi ve API 20C AUX (bioMerieux, Fransa) testi ile karbonhidrat asimilasyonuna g�re yapılmıştır. PNA FISH y�ntemi i�in Yeast Traffic Light� PNA FISH (AdvanDx, ABD) kiti kullanılmıştır. Morfolojik ve biyokimyasal �zelliklerine (konvansiyonel y�ntemler) g�re, 50 Candida izolatının 19 (%38)'u C.albicans, 12 (%24)'si C.glabrata, beşi (%10) C.parapsilosis, beşi (%10) C.kefyr, d�rd� (%8) C.krusei, ikisi (%4) C.guilliermondii, ikisi (%4) C.tropicalis ve biri (%2) C.lusitaniae olarak tanımlanmıştır. PNA FISH y�ntemiyle ise izolatların 24 (%48)'� C.albicans/C.parapsilosis (yeşil floresan), 16 (%32)'sı C.glabrata/C.krusei (kırmızı floresan) ve biri (%2) C.tropicalis (sarı floresan) olarak doğru şekilde tanımlanmış, ancak bir C.tropicalis suşu C.albicans olarak hatalı sonu� vermiştir. Diğer sekiz (%16) suş ise, PNA FISH kitinin değerlendirme� panelinde bulunmayan t�rler olmaları nedeniyle (5 C.kefyr, 2 C.guillermondii ve 1 C.lusitaniae) floresan vermemiş ve diğer Candida spp. olarak değerlendirilmiştir. Buna g�re, kitin belirleyebildiği t�rler (C.albicans, C.parapsilosis, C.glabrata, C.krusei ve C.tropicalis) dikkate alındığında, konvansiyonel y�ntemlerle uyum oranı %97.6 (41/42) olarak; t�m t�rler i�in toplam tanımlama oranı ise %84 (41/50) olarak bulunmuştur. Sonu� olarak; hastanemizde kan k�lt�rlerinden en sık izole edilen t�rlerin sırasıyla C.albicans, C.glabrata ve C.parapsilosis olduğu belirlenmiş; kan k�lt�rlerinde �reyen Candida t�rlerinin tanımlanmasında PNA FISH y�nteminin kolay, g�venilir ve kısa zamanda (90 dakika) sonu� veren bir y�ntem olması nedeniyle rutin laboratuvarlarda kullanılabilir olduğu d�ş�n�lm�şt�r. Bununla birlikte, daha fazla sayıda suşun kullanıldığı ve maliyetin de g�z �n�ne alındığı karşılaştırmalı ileri �alışmalara gerek vardır.

Anahtar s�zc�kler: Candida; tanımlama; peptid n�kleik asit floresan in situ hibridizasyon; PNA FISH; kandidemi.

ABSTRACT

In recent years, increased number of patients who are hospitalized in intensive care units, received immunosuppressive therapy and treated with broad-spectrum antibiotics that can lead an increase in the incidence of systemic candidiasis. In these patients, the most common clinical manifestation is candidemia. Since the identification of Candida species isolated from blood cultures is time consuming by conventional (morphological and biochemical) methods, rapid, reliable and accurate methods are needed. For this purpose novel systems have been developed to identify the agent directly. The aim of this study was to evaluate the peptide nucleic acid fluorescent in situ hybridization (PNA FISH) method for the identification of Candida species by comparing with the conventional methods. A total of 50 patients who were admitted to Erciyes University Medical Faculty Hospital clinics and followed with prediagnosis of systemic fungal infections whose blood cultures were positive for the yeasts between July 2011 and July 2012 were included in the study. The conventional identification of Candida isolates was performed by considering macroscopic and microscopic morphology, germ tube test, cycloheximide sensitivity, urease activity and carbohydrate assimilation patterns with API 20C AUX (bioMerieux, France) test. PNA FISH method was conducted by the use of a commercial kit namely Yeast Traffic Light� PNA FISH (AdvanDx, USA). According to morphological and biochemical characteristics (conventional methods), 19 (38%) out of 50 Candida isolates were identified as C.albicans, 12 (24%) as C.glabrata, five (10%) as C.parapsilosis, five (10%) as C.kefyr, four (8%) as C.krusei, two (4%) as C.guilliermondii, two (4%) as C.tropicalis and one (2%) as C.lusitaniae. On the other hand, 24 (48%) of the isolates were identified as C.albicans/C.parapsilosis (with green fluorescence), 16 (32%) as C.glabrata/C.krusei (with red fluorescence) and one (%2) as C.tropicalis (with yellow fluorescence) properly, however one C.tropicalis strain was misidentified as C.albicans by PNA FISH method. Other eight (16%) strains which were not presented in the evaluation panel of PNA FISH kit (5 C.kefyr, 2 C.guillermondii and 1 C.lusitaniae), gave no fluorescence and determined as other Candida spp. According to this, when the species that could be detected with the kit (C.albicans, C.parapsilosis, C.glabrata, C.krusei and C.tropicalis) were considered, the concordance rate with the conventional methods was determined� as 97.6% (41/42) and the total evaluation rate for all the species was 84% (41/50). In conclusion, the most frequent isolated species from blood cultures in our hospital was C.albicans, followed by C.glabrata and C.parapsilosis. Since PNA FISH testing is a practical, reliable and rapid (resulted in 90 minutes) method for the identification of Candida strains at species level isolated from blood cultures, it was thought to be useful in routine laboratories. However, further comparative studies are required with large number of strains with the consideration of cost-effectiveness.

Keywords: Candida; identification; peptide nucleic acid fluorescent in situ hybridization; PNA FISH; candidemia.

Geliş Tarihi (Received): 27.08.2015 • Kabul Ediliş Tarihi (Accepted): 26.02.2016

GİRİŞ

Candida t�rleri, insanlarda g�r�len en yaygın fungal patojenlerdir. Bu mikroorganizmalar, invazif olmayan y�zeyel enfeksiyonlardan, derin dokuları tutan enfeksiyonlara kadar geniş hastalık spektrumuna sahiptirler1. T�m nozokomiyal fungal enfeksiyonlar arasında Candida t�rlerine bağlı enfeksiyonlar %80 olarak bildirilmekte ve kan k�lt�rlerinden izole edilen etkenler arasında d�rd�nc� sırada bulunmaktadırlar2,3. Mantar enfeksiyonlarının, yoğun bakım biriminde hastane kaynaklı dolaşım sistemi enfeksiyonlarında en sık karşılaşılan etkenler arasında Candida t�rlerinin bulunduğu, etken olarak sırasıyla C.albicans, C.glabrata, C.tropicalis ve C.parapsilosis'in izole edildiği bildirilmiştir4. Bir başka raporda ise, �� yıllık s�re i�inde �ok merkezli hastane kaynaklı dolaşım sistemi enfeksiyonlarında, Candida t�rlerinin %7.6 oranında etken mikroorganizmalar arasında bulunduğu vurgulanmaktadır5. Ayrıca aynı �alışmada, Candida enfeksiyonlarının mortalite oranının y�ksek olduğu ve en sık karşılaşılan t�rlerin C.albicans, C.glabrata, C.krusei, C.parapsilosis ve C.tropicalis olduğu saptanmıştır5.

Kan k�lt�rlerinden mayaların tanımlanması 1-4 g�n gibi uzun s�re almaktadır. Bu nedenle hızlı tanı sağlayabilen, �zg�ll�ğ� ve duyarlılığı y�ksek laboratuvar y�ntemlerine ihtiya� vardır. Son yıllarda �zellikle hızlı tanı i�in molek�ler y�ntemler geliştirilmiştir 6,7. Yapılan �alışmalarda, pozitif kan k�lt�rlerinde C.albicans, C.parapsilosis, C.tropicalis, C.glabrata ve C.krusei'nin tanımlanması i�in tasarlanmış, FDA onayı almış peptid n�kleik asit floresan in situ hibridizasyon (PNA FISH) (Yeast Traffic Light PNA FISH, AdvanDx) y�nteminin kullanılabileceği bildirilmektedir7,8,9,10,11,12. Bu �alışmada, kan k�lt�rlerinde �reyen Candida t�rlerinin tanımlanmasında, PNA FISH y�ntemin değerlendirilmesi ama�lanmıştır.

GERE� ve Y�NTEM

�alışmaya, Temmuz 2011 - Temmuz 2012 tarihleri arasında, Erciyes �niversitesi Tıp Fak�ltesi Hastaneleri kliniklerinde sistemik mantar enfeksiyonu �n tanısıyla takip edilen ve kan k�lt�r�nde maya �reyen 50 hasta alındı. Hastaların yaşı, cinsiyeti, altta yatan hastalığı ve yattığı servis gibi demografik bilgileri kaydedildi.

Kan k�lt�rleri Bact/Alert 3D otomatize sistemi (bioMerieux, Fransa) ile değerlendirildi. �ocuklar i�in BacT/Alert PF Pediatric FAN ve erişkinler i�in BacT/ Alert FA FAN� Aerobic şişeleri (bioMerieux, Fransa) kullanıldı. Cihazda �reme sinyali veren şişelerden Gram boyama sonucu maya olarak tanımlanan kan k�lt�r� �rnekleri toplandı. Kan k�lt�r� şişelerinden �ncelikle Sabouraud dekstroz agara (SDA) ekim yapıldı. Standart suş olarak C.albicans ATCC 90028 kullanıldı.�

Kan k�lt�rlerinde �reyen Candida suşlarının tanımlanmasında; makroskobik ve mikroskobik morfolojisi, �imlenme borusu testi, siklohekzimid hassasiyeti, �reaz testi, API 20C AUX (bioMerieux, Fransa)� karbonhidrat asimilasyonu testi kullanıldı13.

�PNA FISH (Yeast Traffic Light PNA FISH, AdvanDx, ABD) y�nteminin uygulanmasında; kan k�lt�r� şişesinden alınan 10 �l �rnek, bir lam �zerine konulan bir damla tespit sol�syonu ile hafif�e karıştırıldı ve metanol ile tespit edildi. Tespit edilen lamların �zerine bir damla hibridizasyon probu damlatıldı. Lamlar 55C'de, �nceden ısıtılmış yıkama sol�syonunda 30 dakika boyunca bekletildi ve sonra �ıkartılarak dışarıda kuruması sağlandı. �zerine bir damla destek (mounting) sıvısından eklendi; lamelle kapatıldı ve floresan mikroskopta �ift bant filtresi (AdvanDx, ABD) takılarak 40-100X b�y�tmede incelendi. Değerlendirmede; yeşil renkte floresan verenler C.albicans ve C.parapsilosis, kırmızı floresan verenler C.glabrata ve C.krusei, sarı floresan verenler ise C.tropicalis olarak kabul edildi.

BULGULAR

Konvansiyonel (morfolojik ve biyokimyasal) y�ntemler ile, kan k�lt�rlerinden izole edilen 50 Candida suşunun %38'i C.albicans, %24'� C.glabrata, %10'u C.parapsilosis, %10'u C.kefyr, %8'i C.krusei, %4'� C.guilliermondii, %4'� C.tropicalis ve %2'i C.lusitaniae olarak tanımlanmıştır.

PNA FISH y�ntemiyle; yeşil renkli floresan veren 24 (%48) suş C.albicans veya C.parapsilosis, kırmızı renkli floresan veren 16 suş C.glabrata ve C.krusei, sarı renkli floresan veren bir suş ise C.tropicalis olarak değerlendirilmiştir (Resim 1) (Tablo I). C.albicans olarak tanımlanan bir C.tropicalis suşu dışındaki suşların uyumlu sonu� verdiği izlenmiştir (41/42; %97.6) (Tablo I). Floresan vermeyen 8 suş ise diğer Candida t�rleri olarak değerlendirilmiştir. Buna g�re PNA FISH'in değerlendirme panelinde olmayan 5 C.kefyr, 2 C.guillermondii ve 1 C.lusitaniae suşu tanımlanamamıştır. C.albicans ATCC 90028 standart suşu PNA FISH y�ntemiyle yeşil renkli floresan vermiştir.


Resim 1

Tablo I

TARTIŞMA

Sistemik kandidozun sıklığı g�n ge�tik�e �nem kazanmaktadır. Bunlar i�inde en �nemli klinik g�sterge kandidemidir. Kandidemi, zor tanı konulan, sistemik tedavi gerektiren, hastanede kalış s�resini uzatan ve sıklıkla �l�mle sonu�lanan bir enfeksiyondur14. Kandidemiye en sık C.albicans t�r� neden olsa da, diğer Candida t�rleri de yaygın etken olarak g�r�lmektedir15. Lockhard ve arkadaşları162329 kan k�lt�r� ile yaptıkları �alışmada; izole edilen Candida t�rlerini sıklık sırasına g�re; C.albicans (%38), C.glabrata (%29), C.parapsilosis (%17) ve C.tropicalis (%10) olarak bildirmişlerdir. İtalya'da yapılan, 462 kandidemi epizotunun incelendiği �ok merkezli bir �alışmada; en sık izole edilen t�r�n C.albicans (%49.2) olduğu, bunu C.parapsilosis (%26.2) ve C.glabrata (%10.4) t�rlerinin izlediği rapor edilmiştir17. Aynı �alışmada 2000-2013 yılları arasında Avrupa'da yapılan �alışmalar değerlendirilmiş; Fransa, İngiltere ve Kuzey Avrupa'da C.glabrata; T�rkiye, İspanya ve Yunanistan'da ise C.parapsilosis t�r�n�n en yaygın olarak bulunduğu bildirilmiştir17. G�ltekin ve arkadaşları18 kan k�lt�rlerinden en fazla izole edilen t�r�n C.albicans olduğunu, ikinci sıklıkta ise C.parapsilosis'in g�r�ld�ğ�n� ifade etmişlerdir. Diğer bazı �alışmalarda, kan k�lt�r�nde C.guilliermondii, C.krusei ve C.famata t�rlerine de rastlanmıştır18,19. Bizim �alışmamızda, 50 adet kan k�lt�r�nden en sık izole edilen t�r C.albicans (%38) olmuş, bunu C.glabrata (%24), C.parapsilosis (%10) ve C.kefyr (%10), C.krusei (%8), C.guilliermondii (%4), C.tropicalis (%4) ve C.lusitaniae (%2) izlemiştir.

Enfeksiyon hastalıklarının erken tanısında, k�lt�r gibi klasik y�ntemler altın standart olarak �nemini korumakla birlikte, bir�ok etkeninin tanımlanmasında yetersiz kalmaktadır. �oklu diren�li mantarlarla oluşan enfeksiyonlarda, etken t�r�n�n hızla belirlenip tedaviye erken başlanması hayati �nem taşımaktadır. Ancak klasik y�ntemlerle bu s�re� uzun zaman almaktadır. Molek�ler y�ntemler bu s�reci azaltmakta, ayrıca �remesi g�� olan ve zaman alan mantarların tanımlanmasında da �nem taşımaktadır6,7. FISH y�ntemi ile, k�lt�r ve fenotipik �zelliklerin belirlenmesine gerek kalmadan etken mikroorganizmanın tanısı kısa s�rede yapılabilmektedir. Duyarlılık ve �zg�ll�ğ� y�ksek olan bu y�ntemin, pratik ve kolay olmasının yanı sıra yaklaşık 90 dakika gibi kısa bir s�rede t�r d�zeyinde tanımlamaya olanak sağlaması �nemli avantajlardır8,9. Bu y�ntemin, kan k�lt�rlerinden Candida t�rlerinin doğru ve hızlı tanımlanmasında ve kandidemi ile ilgili mortalite ve morbiditeyi azaltacak etkin antifungal tedavinin uygulanmasında �nemli olduğu rapor edilmiştir10,11,12. FISH y�ntemiyle, direkt kan k�lt�rlerinde belirlenebilen Candida t�rleri; literat�rde ve bu �alışmada da belirlediği gibi, sık karşımıza �ıkan C.albicans, C.parapsilosis, C.glabrata, C.krusei ve C.tropicalis t�rlerdir. �alışmamızda, PNA FISH y�ntemi, bu t�rlerden oluşan 42 adet izolatın 41'ini doğru olarak tanımlamış ve konvansiyonel y�ntemlerle uyumu %97.6 olarak bulunmuştur. Buna karşın kit değerlendirme prosed�r�ne g�re toplam tanımlama oranı %84 (41/50) olmuştur. Testin performansı değerlendirildiğinde; PNA FISH y�ntemiyle bir C.tropicalis suşu C.albicans olarak tanımlanmış; kit panelinde yer almayan �� t�re ait sekiz izolat (5 C.kefyr, 2 C.guillermondii ve 1 C.lusitaniae) ise tanımlanamamıştır.

Stone ve arkadaşları8, 54 klinik izolatla yaptıkları �alışmada, mayalarla s�spansiyon hazırlayarak negatif kan k�lt�r� şişelerine inok�le etmiş, ink�basyon sonucunda PNA FISH y�nteminin duyarlılığını, C.albicans/C.parapsilosis i�in %100, C.glabrata/C.krusei i�in %92.3 ve C.tropicalis i�in %100 olarak bulmuşlardır. �eşitli �alışmalarda da, PNA FISH y�nteminin hızlı, kolay uygulanabilir ve tanımlama s�resini �nemli �l��de azaltabilecek bir y�ntem olduğu rapor edilmiştir9,10. Lakner ve arkadaşlarının11, 110 klinik izolat kullanarak yaptıkları �alışmada, fenotipik y�ntemlerle PNA FISH y�ntemi karşılaştırılmış ve PNA FISH y�nteminin duyarlılığı %100 olarak bulunmuştur. Yapılan bir diğer �alışmada, PNA FISH y�nteminin performansı, 17 periton ve 103 kan k�lt�r� �rneğinde değerlendirilmiş; kitin değerlendirme panelinde olmayan suşların ve bir C.albicans suşunun tanımlanamadığı bildirilmiştir12. Amerika'da 216 ve İngiltere'de 50 pozitif kan k�lt�r� kullanılarak yapılan �alışmalarda ise, y�ntemin tanımlama doğruluğu bizim �alışmamızda da olduğu gibi %96 olarak bulunmuştur7,16.

Sonu� olarak, hastanemizde kan k�lt�rlerinden en sık izole edilen t�rler, PNA FISH y�nteminin tanımlama yapabildiği (C.albicans, C.parapsilosis, C.glabrata, C.krusei ve C.tropicalis) t�rlerdir. Bu nedenle, kan k�lt�rlerinden Candida t�rlerinin tanımlanmasında, PNA FISH y�nteminin kolay, doğru ve g�venle kullanılabilir olduğu kanısına varılmıştır. Bu y�ntem ayrıca, 90 dakika gibi kısa bir s�rede tanımlama yapabildiğinden, rutin laboratuvarlarda kullanılmasının faydalı olabileceği d�ş�n�lmektedir. Buna karşın, daha fazla sayıda suş kullanılarak ve maliyet analizi yapılarak ger�ekleştirilecek karşılaştırmalı ileri �alışmalara gereksinim vardır.

KAYNAKLAR

  1. Verduyn Lunel FM, Meis JF, Voss A. Nosocomial fungal infections: candidemia. Diagn Microbiol Infect Dis 1999; 34(3): 213-20.
  2. Singh N. Changing spectrum of invasive candidiasis and its therapeutic implications. Clin Microbiol Infect 2001; 7 Suppl 2: 1-7.
  3. Beck-Sague C, Jarvis WR. Secular trends in the epidemiology of nosocomial fungal infections in the United States, 1980-1990. National Nosocomial Infections Surveillance System. J Infect Dis 1993; 167(5): 1247-51.
  4. Rangel-Frausto MS, Wiblin T, Blumberg HM, et al. National epidemiology of mycoses survey (NEMIS): variations in rates of bloodstream infections due to Candida species in seven surgical intensive care units and six neonatal intensive care units. Clin Infect Dis 1999; 29(2): 253-8.
  5. Edmond MB, Wallace SE, McClish DK, Pfaller MA, Jones RN, Wenzel RP. Nosocomial bloodstream infections in United States hospitals: a three-year analysis. Clin Infect Dis 1999; 29(2): 239-44.
  6. Meletiadis J, Arabatzis M, Bompola M, et al. Comparative evaluation of three commercial identification systems using common and rare bloodstream yeast isolates. J Clin Microbiol 2011; 49(7): 2722-7.
  7. Gorton RL, Ramnarain P, Barker K, et al. Comparative analysis of Gram's stain, PNA-FISH and Sepsityper with MALDI-TOF MS for the identification of yeast direct from positive blood cultures. Mycoses 2014; 57(10): 592-601.
  8. Stone NR, Gorton RL, Barker K, Ramnarain P, Kibbler CC. Evaluation of PNA-FISH yeast traffic light for rapid identification of yeast directly from positive blood cultures and assessment of clinical impact. J Clin Microbiol 2013; 51(4): 1301-2.
  9. Da Silva RM Jr, Da Silva Neto JR, Santos CS, et al. Evaluation of fluorescence in situ hybridisation (FISH) for the detection of fungi directly from blood cultures and cerebrospinal fluid from patiens with suscepted invasive mycoses. Ann Clin Microbiol Antimicrob 2015; 14:6.
  10. Gherna M, Merz WG. Identification of Candida albicans and Candida glabrata within 1.5 hours directly from positive blood culture bottles with a shortened peptide nucleic acid fluorescence in situ hybridization protocol. J Clin Microbiol 2009; 47(1): 247-8.
  11. Lakner A, Essig A, Frickmann H, Poppert S. Evaluation of fluorescence in situ hybridisation (FISH) for the identification of Candida albicans in comparison with three phenotypic methods. Mycoses 2012; 55(3): e114-23.
  12. Harris DM, Hata DJ. Rapid identification of bacteria and Candida using PNA-FISH from blood and peritoneal fluid cultures: a retrospective clinical study. Ann Clin Microbiol Antimicrob 2013; 12:2.
  13. Hazen KC, Howell SA. Candida, Cryptococcus and other yeast of medical importance, p: 1762. In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH (eds), Manual of Clinical Microbiology. 2007, 9th ed. ASM Press, Washington D.C.
  14. Das I, Nightingale P, Patel M, Jumaa P. Epidemiology, clinical characteristics, and outcome of candidemia: experience in a tertiary referral center in the UK. Int J Infect Dis 2011; 15(11): e759-63.
  15. Tortorano AM, Peman J, Bernhardt H, et al. Epidemiology of candidaemia in Europe: results of 28-month European Confederation of Medical Mycology (ECMM) hospital-based surveillance study. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2004; 23(4): 317-22.
  16. Lockhart SR, Iqbal N, Cleveland AA, et al. Species identification and antifungal susceptibility testing of Candida bloodstream isolates from population-based surveillance studies in two U.S. cities from 2008 to 2011. J Clin Microbiol 2012; 50(11): 3435-42.
  17. Montagna MT, Lovero G, Borghi E, et al. Candidemia in intensive care unit: a nationwide prospective observational survey (GISIA-3 study) and review of the European literature from 2000 through 2013. Eur Rev Med Pharmacol Sci 2014; 18(5): 661-74.
  18. G�ltekin B, Eyig�r M, Tiryaki Y, Kırdar S, Aydın M. Investigation of antifungal susceptibilities and some virulence factors of Candida strains isolated from blood cultures and genotyping by RAPD-PCR. Mikrobiyol Bul 2011; 45(2): 306-17.
  19. Hall L, Le Febre KM, Deml SM, Wohlfiel SL, Wengenack NL. Evaluation of the Yeast Traffic Light PNA FISH probes for identification of Candida Species from positive blood cultures. J Clin Microbiol 2012; 50(4): 1446-8.

İletişim (Correspondence):

Prof. Dr. Ayşe Nedret Ko�,

Erciyes �niversitesi Tıp Fak�ltesi

Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı,

38039 Kayseri, T�rkiye.

Tel (Phone): +90 352 207 6666-23379/20204,

E-posta (E-mail): anedret@erciyes.edu.tr

Yazdır